Startery do PCR użyte do powielenia przy użyciu tych powtórzeń do badań genotypowych były następujące: AG: 5 (3 -CTGCAGGAAGAGGGAGAAATGGGAA-3. / 5. -AGAAGTTAAGTGACTTGCCCATGGC-3. ATT: 5. -TTTCAGCCTCAGTATCTTTATTTG-3. / 5. -ACCTAAAGTCTTTCTGCCAGTTAT-3. Analiza Western blot. Próbki limfoblastu i guza solubilizowano w 2% SDS. Równoważne stężenia białka lizatu poddano elektroforezie na 10% żelu denaturującym akrylamid i przeniesiono na membranę PVDF. Western blotting przeprowadzono z użyciem anty-aktyny (Sigma Chemical Co., St Louis, Missouri, ...
Izomaltaza kończy się resztą aminokwasową Arg1007, a sacharaza rozpoczyna się zaraz potem Ile1008. Wskazano lokalizację mutacji L340P u pacjenta z CSID i przypuszczalnego miejsca cięcia. Sekwencja peptydu Arg / Ile między izomaltazą i sukrazą jest miejscem trypsyny, w którym dojrzały prekursor pro-SI jest rozszczepiany w świetle jelita przez trypsynę trzustkową (16). (b) Schematyczny rysunek orientacji membrany pro-SI. Wyznacza się koniec NH2 po stronie cytosolowej błony (N), koniec COOH światła (C), domenę łodygi i przypuszczalny obszar cięci...
Skalowane pręty: 0,1 .m. Izolacja cDNA SI z tkanki pacjenta i identyfikacja mutacji punktowej odpowiedzialnej za fenotyp CSID. Normalne syntetyczne poziomy SI w próbce biopsyjnej pacjenta i zmienione posttranslacyjne zachowanie silnie potwierdziły pogląd, że mutacja lub delecja w regionie kodującym genu SI była odpowiedzialna za generowanie tego fenotypu SI. Izolacja cDNA SI umożliwiłaby zatem identyfikację zmian w cDNA prawdopodobnie odpowiedzialnym za ten fenotyp. Ponadto, ekspresja cDNA w heterologicznym systemie transfekcji pomoże zidentyfikować eta...
