Nadekspresja syntazy prostacyklinowej u myszy transgenicznych chroni przed rozwojem hipoksycznego nadciśnienia płucnego ad 5

Aktywność enzymu PGIS jest zwiększona u zwierząt transgenicznych. W celu określenia, czy podwyższone poziomy funkcjonalnej aktywności PGIS wystąpiły u transgenicznych zwierząt, przeprowadzono test aktywności enzymu PGIS. Poziomy tkankowe płuc stabilnego metabolitu PGI2 6-keto PGF1. zmierzono na kodowanych próbkach po inkubacji tkanki płuc z AA. Stwierdziliśmy, że zwierzęta Tg + w linii 9 wytwarzają prawie dwa razy więcej 6-keto PGF1. w tkance płucnej tak jak Tg. współdziała z miotami (3,107. 608 ng / g tkanki [n = 10] w porównaniu z 1559. 277 ng / g tkanki [n = 11]; P = 0,01) (figura 4). W linii o pośrednim wyrażaniu (linia 7) zwierzęta Tg + wytwarzały 47% więcej 6-keto PGF1. niż Tg. (2,104. 195,7 ng / g tkanki [n = 16] vs. 1,431. 182 ng / g tkanki [n = 20]; P <0,05) (dane nie przedstawione). Ryc. 4. Aktywność PGIS w płucach. Całe płuca homogenizowano w buforze zawierającym AA. Stabilny produkt rozpadu PGI2, 6-keto PGF1a, oznaczano jako bezpośrednią miarę aktywności enzymu PGIS. Zwierzęta transgeniczne (n = 5) miały istotnie wyższe 6-keto PGF1. w porównaniu do ich nietransgenicznych (n = 5) młodych miotów (3,107 w porównaniu z 1,159 ng / g tkanki; P = 0,01). Zarówno transgeniczne zwierzęta PGIS, jak i ich nietransgeniczni mioty z miotu wykazują reakcję policytemiczną z ekspozycją na przewlekłe niedotlenienie. Na wysokości Denver (Pb = 630 mmHg, inspirowane PO2 = 122 mmHg), Tg + (n = 5) i Tg. zwierzęta (n = 5) miały podobne wartości hematokrytu (32,2. 1,7% w porównaniu z 33,2. 2,8%, P = 0,77, nieistotne [ns]). W odpowiedzi na przewlekłą hipoksję, zarówno Tg + (n = 5) i Tg. (n = 5) zwierzęta rozwinęły czerwienicę (Tg +: 32,2. 1,7% vs. 47,8. 2,8%, P = 0,002; Tg. 33,2. 2,8% vs. 46,4. 0,8%, P = 0,005). Zakres czerwienicy był taki sam dla Tg + i Tg. zwierzęta (47,8 . 2,8% vs. 46,4. 0,8%, P = 0,78, ns) (Figura 5). Figura 5 Hematokryty zwierząt w punkcie wyjściowym i po ekspozycji na niedotlenienie hipobaryczne. Transgeniczne zwierzęta (n = 5) i nietransgeniczne mioty (n = 5) nie różniły się hematokrytami na początku badania (32,2% vs. 33,2%, P = ns). Po przedłużonej ekspozycji na niedotlenienie hipobaryczne, zarówno transgeniczne (n = 5), jak i nietransgeniczne (n = 5) zwierzęta rozwijały znacząco podwyższone hematokryty w porównaniu z kontrolami powietrza w pomieszczeniu (32,0 vs. 47,8 dla Tg + [* P = 0,002]; 33,2 vs. 46,4 dla Tg. [* P = 0,005]). Różnica hematokrytu pomiędzy transgenicznymi i nietransgenicznymi miotami nie była istotna na wysokości (47,8 vs. 46,4; P = ns). Myszy wykazujące ekspresję PGIS nie wykazują odpowiedzi z nadciśnieniem płucnym na ostry niedotlenienie. W celu upewnienia się, czy myszy wykazujące ekspresję PGIS mają stępioną odpowiedź na niedotlenienie skurczu naczyń, myszy Tg + (n = 10) i Tg. dzieci z miotu (n = 14) były eksponowane na ostrą niedotlenienie (FIO2 = 0,1) przez 15 minut i przeprowadzono ocenę RVSP. Na poziomie podstawowym (wysokość Denver na wysokości 5280 stóp), Tg + (n = 5) i Tg. (n = 5) nie wykazywały różnicy w RVSP (30,0. 1,2 mmHg vs. 31,1. 2,4 mmHg; P = 0,68, ns). Po ostrym niedotlenieniu myszy Tg + nie wykazywały zwężenia naczyń, podczas gdy Tg. myszy wykazywały podwyższone RVSP (30,1 ą 1,4 mmHg w porównaniu z 35,4 ą 1,4 mmHg; P = 0,02) (Figura 6). Figura 6 RVSP na linii podstawowej, z ostrą niedotlenieniem i po ekspozycji na niedotlenienie hypobaryczne. Bezpośrednie ciśnienie w prawej komorze określano techniką kaniulacji przezklatkowej, jak opisano w Metodach. Na poziomie wyjściowym (kontrola, wysokość denver), zwierzęta transgeniczne (n = 5) i nietransgeniczne (n = 5) wykazują podobne RVSP (30,0 w porównaniu do 31,1 mm Hg; P = 0,68, ns). Przy ostrym niedotlenieniu transgeniczne myszy (n = 10) nie wykazywały zwężenia naczyń w porównaniu z ich nietransgenicznymi miotami (n = 14) (30,1 vs. 35,4 mmHg; * P = 0,02). Po 5 tygodniach ekspozycji na niedotlenienie niedotlenione, nietransgeniczne zwierzęta (n = 5) miały znacząco wyższe RVSP niż zwierzęta transgeniczne PGIS (n = 5) (46,6 vs. 29,2 mmHg; ** P = 0,001). Myszy z nadekspresją PGIS są chronione przed rozwojem przewlekłego hipoksycznego nadciśnienia płucnego. Aby określić biologiczną skuteczność nadekspresji PGIS, myszy Tg + i Tg. Współcześni bracia byli wystawieni na symulowaną wysokość 17 000 stóp przez 5 tygodni. Po ekspozycji zwierzęta analizowano pod kątem hematokrytu, RVSP i histologicznego badania płuc. RVSP mierzono jako przybliżenie ciśnienia w tętnicy płucnej. Tg. zwierzęta (n = 5) rozwinęły znaczące nadciśnienie płucne, z RVSP średnio 46,6. 0,66 mmHg. Zwierzęta transgeniczne PGIS (n = 5) nie rozwinęły nadciśnienia płucnego, mając średnią RVSP 29,2. 4,4 mmHg (P = 0,001) (Figura 6). Zwierzęta transgeniczne z linii pośredniej ekspresji (linia 7) nie były chronione przed rozwojem nadciśnienia płucnego po przewlekłym niedotlenieniu [przypisy: podchloryn sodu dawkowanie, czym słodzić zamiast cukru, objawy refluksu u dzieci ] [hasła pokrewne: sklep pszczelarski łysoń, bartnik bielsko, przychodnia bielsko komorowicka ]