Nadekspresja syntazy prostacyklinowej u myszy transgenicznych chroni przed rozwojem hipoksycznego nadciśnienia płucnego ad 6

W tej linii zwierzęta Tg + (n = 4) rozwinęły podwyższone RVSP w podobnym stopniu jak Tg. mioty (n = 3) (35,3. 4,9 mmHg vs. 40,5. 2,8 mmHg; P = 0,44, ns). Analiza mocy (zakładając dwustronny błąd typu I wynoszący 5%) danych porównujących Tg + i Tg. w wierszu 7 wskazuje się, że nie można oczekiwać statystycznie istotnej różnicy między tymi grupami, chyba że badane jest 40 zwierząt na grupę, jeśli rzeczywiście taka różnica występuje. Myszy wykazujące ekspresję PGIS nie mają przebudowy naczyń po hipoksji hipobarycznej. Przeprowadzono analizę morfometryczną układu naczyniowego (małe do średnich tętnic 30. 50. M) od zwierząt kontrolnych (wysokość Denver) i zwierząt wysoko na wysokości. Ślepy obserwator (RM Tuder) ilościowo określił grubość ściany naczynia. Na początku w Denver, Tg + (n = 5) i Tg. (n = 5) zwierzęta nie wykazały morfologicznej różnicy grubości ścianek naczynia (0,165. 0,009 vs. 0,167. 0,007; P = 0,85, ns). Po ekspozycji na niedotlenienie hypobaryczne zwierzęta Tg + (n = 5) nie rozwinęły przerostu ściany naczynia w porównaniu z ich Tg. mioty z młodymi (n = 5) (0,169. 0,007 vs. 0,204. 0,008; P = 0,0015) (Figura 7a). Jak pokazano na rycinie 7b, znaczny przerost ściany naczynia rozwinął się w Tg. zwierzęcia w porównaniu z miotem z Tg + po ekspozycji na niedotlenienie niedotlenione. Należy zauważyć, że żadne zwierzę nie rozwinęło stanu zapalnego w odpowiedzi na chroniczne niedotlenienie. Ryc. 7 Histologia płuc z narażonych zwierząt na dużej wysokości. (a) Porównanie grubości ścianki naczynia od małych do średnich (30. 50. m) tętnic płucnych. Grubość ścianki naczynia została obliczona na podstawie średnicy zewnętrznej (Ed) minus średnica wewnętrzna (Id) podzielona przez średnicę zewnętrzną: (Ed. Id) / Ed. Na poziomie wyjściowym (kontrola, wysokość denver) transgeniczne (n = 5) i nietransgeniczne (n = 5) zwierzęta mają podobną grubość ściany naczynia (0,165 vs. 0,167; P = 0,85, ns). Po przewlekłym niedotlenieniu nietransgeniczne zwierzęta (n = 5) miały znacznie większy przerost ściany naczynia od małych do średnich naczyń niż myszy transgeniczne (n = 5) (0,21 vs. 0,16; * P = 0,0015). (b) histologia naczyniowa (× 400). Zbiorniki o porównywalnych średnicach, wykazujące przerost ściany naczynia u nietransgenicznych zwierząt w porównaniu ze zwierzętami transgenicznymi. Tg ., nietransgeniczny miot; Tg +, zwierzę transgeniczne. Strzałki wskazują mierzone naczynia. Wraz z przerostem ściany naczynia, Tg. naczynia pokazują znaczenie komórek śródbłonka. Dyskusja Specyficzna dla płuc nadekspresja szczurzego PGIS w nabłonku oddechowym transgenicznych myszy została osiągnięta przez transgen kierowany przez elementy wzmacniane przez promotor z 5. region ludzkiego genu SP-C. Zgodnie z naszą wiedzą, nasze wyniki są pierwszymi, które wykazują, że nadekspresja tego genu specyficzna dla płuc chroni przed nadciśnieniem płucnym wywołanym niedotlenieniem niedotlenionym. Wyniki te potwierdzają hipotezę, że niedobór syntezy prostacykliny w płucach (15, 17) może odgrywać rolę w rozwoju nadciśnienia płucnego. Chociaż ciągły wlew PGI2 został zaakceptowany jako skuteczne leczenie PPH, nigdy nie przeprowadzono przedklinicznej próby przewlekłego leczenia PGI2, głównie ze względu na kłopotliwy i kosztowny charakter urządzeń do ciągłego dostarczania leku potrzebnych do tego rodzaju badań na zwierzętach. PGI2 i jego analogi mają krótki biologiczny okres półtrwania, ograniczając ich użyteczność w badaniach przewlekłych. PGI2 został dostarczony w drodze aerosolizacji, dzięki czemu może działać transepitalnie. Rzeczywiście, model prosiąt z niewydolnością oddechową z nadciśnieniem płucnym ujawnił, że wdychany PGI2 był lepszy od dożylnego PGI2 w poprawie utlenowania i hemodynamice płucnej (22). W naszych eksperymentach zdecydowaliśmy się użyć promotora SP-C nabłonka zamiast promotora specyficznego dla naczyń, ponieważ potrzebowaliśmy silnej ekspresji transgenu w płucach. Zachęciły nas wcześniejsze wyniki skutecznej terapii inhalacyjnej PGI2 (20-22), które dostarczają uzasadnienia, że można uzyskać przeznabłonkowe dostarczanie PGI2 do struktur naczyniowych z komórek nabłonka z nadekspresją PGIS i dostarczania PGI2 w sposób parakrynny. Opracowaliśmy kilka linii transgenicznych zwierząt PGIS i odkryliśmy, że wszystkie zwierzęta miały normalny fenotypowy wygląd i normalną płodność, rozmiar miotu, morfologię płuc i długość życia. Nasza linia o najwyższej ekspresji wykazała niemal 2-krotny (200%) wzrost 6-keto PGF1. produkcja po inkubacji homogenatu tkanki płucnej z podłożem AA. Fakt, że linia o wysokiej liczbie kopii w analizie Southern i silnej ekspresji metodą Northern blot miała tylko 2-krotny wzrost funkcjonalnej aktywności PGIS w tkance płucnej, można wyjaśnić przez bezpośrednią dostępność substratu (PGH2) lub stabilność produktu transgenu.
[patrz też: bartnik pl, carcinoma adenoides cysticum, płatki owsiane na wodzie ]
[przypisy: ostry dyzur okulistyczny, klinika stomatologiczna łódź, carcinoma adenoides cysticum ]