Nowatorski niedobór odporności związany z hipomorficznymi mutacjami RAG1 i zakażeniem CMV ad

Ten niedobór TCR. + T utrzymywał się przez kilka miesięcy (dane nie pokazane). Kontrola zakażenia CMV przez terapię przeciwwirusową nie miała wpływu na TCR. Liczba komórek T (dane nie pokazane). Zarówno CD4 + i CD8 + TCR. Limfocyty T wykrywano przy użyciu pamięci / aktywowanego fenotypu (CD45RO / HLA klasa II +). Rozkład zmiennej TCR. łańcuch (TCRVB) oceniano za pomocą immunofluorescencji stosując specyficzne mAb przeciwko limfocytom T CD4 + lub przez analizę PCR. Wszyscy badani członkowie rodziny TCRVB byli obecni, ale niektórzy byli w nadmiarze (tacy jak VB14 w P2 i P4, VB20 w P2 i VB3 w P3) (Figura 1). Nie byliśmy w stanie ocenić dystrybucji TCRVB na limfocytach T CD8 +, ponieważ większość podgrup komórek T CD8 wyrażała. TCR (patrz poniżej). Drugą charakterystyczną cechą tych 4 pacjentów była nadreprezentacja komórek TCR + T (Tabela 1). Pokazaliśmy, z przeciwciałami specyficznymi dla V. i V. rodzin i metodą analizy PCR, że te rodziny były obecne u każdego pacjenta, ale ich dystrybucja różniła się pomiędzy pacjentami (ryc. 2). Obserwowaliśmy rozkład tych rodzin w czasie w P2 i stwierdziliśmy, że jest stabilny przez 4-miesięczny okres obserwacji. Limfocyty T od P1 były w większości V. 2 i V. 3; Limfocyty T z P2 były w większości V (1 i V (5; Limfocyty T od P3 były w większości V (1; i Limfocyty T z P4 były w większości V. 2. Nie było oczywistej dominacji V. rodziny (rysunek 2). Godna uwagi jest fizjologiczna nadreprezentacja V. 9 wśród krwi. Komórki T nie stwierdzono u tych 4 pacjentów. Analiza rozkładu długości CDR3 w różnych V. i V. Limfocyty T z P2, P3 i P4 wykazywały mniej pików niż obserwowano w kontroli. Komórki T (ryc. 2). Sekwencjonowanie CDR3 z pików wykazało ograniczoną różnorodność, jak pokazano w Tabeli 2 dla komórek V. 3 i V. 3 klonujących dla P4. Ta obserwacja była prawdziwa dla wszystkich V. i V. rodziny, z wyjątkiem V. 9, które nie wykazywały rozkładu Gaussa w kontrolach (Figura 2). U obu badanych pacjentów (P1 i P3) wykazano, że komórki TCRy + T to CD45RO +, CD45RAa, CD27a, CD28a, profil charakterystyczny dla późno zróżnicowanych komórek T pamięci (26) (tabela 1). Ogólna ekspansja oligoklonalnej populacji komórek TCRy + T z TCRV. i -V. w związku z tym stosowanie innych niż kontrolne było wspólną cechą tych 4 pacjentów. Badano, czy świeży lub niespecyficznie ekspandowany. Komórki T z P1 i P3 mogą być aktywowane przez komórki zakażone CMV (25) albo do proliferacji, wytwarzania TNF-a, albo do wywierania aktywności cytolitycznej. Wyniki były ujemne (dane nie przedstawione). Komórki T mogą jednak proliferować w obecności fitohemaglutyniny (PHA) plus IL-2 (25). Ryc. Wykorzystanie TCRVB przez pacjentów. Limfocyty T. (A) Repertuar VB oznaczono przy użyciu dostępnego specyficznego mAb w teście immunofluorescencji w P2 i P4 lub przy użyciu analizy PCR w czasie rzeczywistym w P3. W tym ostatnim pacjencie podobne wyniki uzyskano za pomocą analizy PCR i przy użyciu dostępnego specyficznego mAb w teście immunofluorescencji (dane nie pokazane). Oś x wskazuje rodziny VB; oś y wskazuje względną częstotliwość użycia (%) w TCR. Komórki T. Kontrolki wartości pokazane w prostokątach reprezentują średnią. 2 SD. Szare słupki wskazują na nieprawidłowe użycie VB. *Nie skończone. (B) Profile fluorescencyjnego V. -C. produkty odpływu otrzymane z komórek jednojądrzastych. Oś x wskazuje długość CDR3. Rysunek 2TCRV. i -V. korzystanie przez pacjentów. Limfocyty T. V. (A) i V. (C) repertuar oznaczono albo przy użyciu dostępnego specyficznego mAb w teście immunofluorescencji w P1 lub stosując analizę PCR w czasie rzeczywistym w P2, P3 i P4. Oś X wskazuje V. wykorzystanie rodziny przez TCR. komórki; oś y wskazuje względną częstotliwość (%) w TCR. Komórki T. Kontrolki wartości pokazane w prostokątach reprezentują średnią. 2 SD. Podobne wyniki uzyskano przy użyciu dostępnego specyficznego mAb w teście immunofluorescencji (dane nie pokazane). *Nie skończone. Profile fluorescencyjnego V. -C. (B) i V. -C. (D) produkty odpływu otrzymane z komórek jednojądrzastych. Oś x wskazuje długość CDR3. Tabela Pacjenci. charakterystyka immunologiczna: podzbiory limfocytów we krwi i badania proliferacji Tabela 2CDR3 sekwencji V3-3 i V33 u pacjenta 4 In vitro, indukowane PHA i indukowane antygenem proliferacje w odpowiedzi na toksoid tężcowy (P2, P3) i antygen CMV (P2) , odpowiednio, zostały wykryte. Po ekspozycji na antygen, tylko TCR. Stwierdzono proliferację komórek CD4 + (dane nie pokazane). Komórki T pacjentów nie wykazywały zatem wady sygnału. IgG surowicy wykryto w 3 przypadkach (P2, P3 i P4). W przeciwieństwie do P1 miał głęboką panhypogammaglobulinemię. Stężenie IgE w surowicy, testowane w 3 przypadkach, było niskie. Zadziwiająco, gdy testowano P2P4, wykryto przeciwciała przeciwko CMV zarówno IgM (w P2 i P4), jak i IgG (w P2 i P3).
[podobne: wrzodziejące zapalenie jelita grubego dieta, płatki owsiane na wodzie, łysoń sklep ]
[hasła pokrewne: przeszczep szpiku kostnego, gorvita zielony jęczmień opinie, łysoń sklep ]