Receptor wykrywający wapń jest wymagany do prawidłowej homeostazy wapnia, niezależnie od hormonu przytarczyc ad 5

Histologiczne badanie gruczołów przytarczycznych. Badanie przytarczyc z Pth. /. CaR. /. myszy wykazały wyraźny wzrost wielkości gruczołów i nadkomórkowość u trzech z trzech badanych zwierząt (Figura 3). Jest to zgodne z wcześniejszymi obserwacjami w CaR. /. myszy (14). Zatem przerost przytarczyc u myszy z niedoborem CaR może wystąpić niezależnie od obecności PTH. Pięćdziesiąt procent zwierząt kontrolnych (jedna z dwóch myszy Ptha / A CaR + / y i jedna z dwóch myszy Ptha / aOr + / +) wykazywało pewien stopień rozrostu. Analizy biochemiczne. Zmierzyliśmy poziomy wapnia, fosforu i kreatyniny w surowicy i moczu (Tabela 1). Występowała tendencja do hiperkalcemii i hiperkalciurii w Pth. /. CaR. /. myszy w stosunku do kontroli, ale różnice w tych pomiarach w surowicy i moczu nie osiągnęły istotności statystycznej. Dalsze badanie danych i wartości P sugerowały, że zwiększenie wielkości próby nie zwiększyłoby znaczenia. Chociaż średnie wartości dla wapnia w surowicy, stosunek wapnia wapnia do kreatyniny w moczu i frakcjonowane wydalanie wapnia nie różniły się istotnie pomiędzy Ptha / p CaR2 / a. myszy i myszy kontrolnych, zmienność w tych wartościach była znacznie większa w Pth (3 (3-CaR2 /. myszy niż w grupie kontrolnej (Figura 3). Zmienność poziomów wapnia w surowicy Pth. /. CaR. /. myszy (SD = 16,523) były znacząco większe niż zmiany w grupach kontrolnych (SD = 0,470, P <0,0001) (tabela i figura 4a). Podobnie, zmienność stosunku wapnia / moczu w moczu, stosunek Pth. /. CaR. /. myszy (SD = 1,178) było znacząco większe niż zmienność w próbach kontrolnych (SD = 0,3888, P <0,001) (Tabela i Figura 4b), a zmienność w ułamkowym wydalaniu wapnia dla Ptha / aCaRp /. zwierzęta były istotnie większe (P <0,0001) niż zwierzęta z grupy kontrolnej (Tabela i Figura 4c). Figura 4Histologiczny wygląd przytarczyc od myszy kontrolnych (a) i Ptha / p CaRc /. dobrani pod względem płci mioty (b). Skrawki przygotowano od dorosłych myszy do mikroskopii świetlnej i barwiono H & E. Zmiany w ekspresji transportera wapnia w jelitach i nerkach. Przebadaliśmy ekspresję mRNA CaT1 (30) i CaT2 / ECaC (31, 32) w dwunastnicy i nerkach za pomocą ilościowej reakcji PCR w czasie rzeczywistym. Wyniki znormalizowano w celu kontrolowania poziomów ekspresji zwierząt w 100%. Porównano ekspresję w próbkach RNA z trzech par dopasowanych pod względem płci krów z miotu utrzymywanych na diecie wysokobiałkowej i trzech par współżyjących z miotu na regularnych dietach. Przeprowadziliśmy oznaczenia w dwóch egzemplarzach dla każdej próbki RNA. Ekspresja CaT1 i CaT2 / ECaC była konsekwentnie wyższa w nerkach myszy z niedoborem CaR (odpowiednio 65% i 60%, dane z obu diet) (Figura 5). Różnice te osiągnęły istotność statystyczną przy P = 0,015 i P = 0,0025, odpowiednio w testach t dla par. Figura 5 Poziomy ekspresji CaT1 i CaT2 / ECaC są zmienione w Ptha / P CaRc / r. myszy w stosunku do osobników z miotu kontrolnego. Poziomy ekspresji mRNA CaT1 (czarne słupki) i CaT2 / ECaC (białe słupki) w dwunastnicy i nerkach oceniano za pomocą ilościowej PCR w czasie rzeczywistym i znormalizowano względem poziomów mRNA GAPDH. Porównano ekspresję w próbkach RNA z trzech par dopasowanych do płci ściółki utrzymywanych na diecie bogatej w wapń (2% wapnia, góra) i trzech par dobranych pod względem płci kociąt w normalnych dietach (0,81% wapnia, dno). Przeprowadziliśmy oznaczenia w dwóch egzemplarzach dla każdej próbki RNA. Ekspresja nerek CaT1 i CaT2 / ECaC była konsekwentnie wyższa u myszy z niedoborem CaR, niezależnie od diety (średnia zwiększona ekspresja odpowiednio 65% i 60%). Różnice te osiągnęły istotność statystyczną przy P = 0,015 i P = 0,0025, odpowiednio w testach t dla par. Ekspresja jelitowego CaT1 była wysoce zmienna. U zwierząt karmionych dietami wysokobiałkowymi, jak również tymi karmionymi regularnymi dietami, ogólną tendencją było zwiększenie ekspresji CaT1 u zwierząt z niedoborem CaR, ale ta tendencja nie osiągnęła istotności statystycznej, zarówno gdy grupy analizowano oddzielnie zgodnie z dietą, jak i gdy wszystkie sześć par analizowano razem. Wykazano, że ekspresja jelitowego CaT1 jest obniżona u zwierząt karmionych dietami wysokobiałkowymi (33). U myszy, które badano, karmiono dietami wysokobiałkowymi, ekspresja jelitowa CaT1 była wysoce zmienna. Zarówno u myszy karmionych dietami wysokobiałkowymi, jak i tymi karmionymi regularnymi dietami, ogólną tendencją było zwiększenie ekspresji CaT1 u zwierząt z niedoborem CaR, ale nie osiągnęło to istotności statystycznej, gdy grupy analizowano oddzielnie zgodnie z dietą lub gdy wszystkie sześć par analizowano łącznie (ryc. 5). Fenotyp szkieletu Pth. /. CaR. /. myszy [hasła pokrewne: przeszczep szpiku kostnego, carcinoma adenoides cysticum, gorvita zielony jęczmień opinie ] [hasła pokrewne: operacje plastyczne dr szczyt, finasteryd skutki uboczne, dom latających sztyletów cda ]