Receptor wykrywający wapń jest wymagany do prawidłowej homeostazy wapnia, niezależnie od hormonu przytarczyc czesc 4

Wzdłużne przekroje środkowo-środkowe 7 .m grubości wszystkich tkanek przygotowano do analizy histomorfometrycznej. Wszystkie pomiary przeprowadzono przy użyciu mikroskopu Olympus; Zdjęcia zostały wykonane i przeanalizowane przy użyciu oprogramowania Metamorph (Universal Imaging Corporation, Downingtown, Pennsylvania, USA). Objętość kości beleczkowatej oceniano na wtórnej gąbczastości proksymalnej kości piszczelowej, dalszej kości udowej i kręgosłupa lędźwiowego przy powiększeniu x 40 na skrawkach barwionych H & E i wyrażono jako procent całkowitej objętości tkanki. Liczbę osteoklastów oceniano w tych samych regionach na odcinkach barwionych TRAP przy powiększeniu x100 i wyrażano jako liczbę osteoklastów na milimetr powierzchni kości. Powierzchnię beleczki znakowaną podwójnymi lub pojedynczymi znacznikami mierzono za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej przy powiększeniu x 400. Pomiary przeprowadzono na dwóch polach na odcinek dwóch kolejnych odcinków. Współczynnik adhezji minerałów (MAR) i szybkość tworzenia kości (BFR) zostały obliczone na podstawie badania kości tetracykliny i kości znakowanych kalceiną, jak opisano wcześniej (29). Statystyka. Oceniliśmy różnice między wieloma Pth. /. CaR. /. i kontrolować krewnych z miotu za pomocą sparowanych testów t. Wszystkie wartości są wyrażone jako średnie. SD. Obliczenia i wykresy zilustrowane w Tabeli 1, Ryc. 3 i Ryc. 6 zostały wykonane przy użyciu graficznego wykresu GraphPad Prism 3.0, dopasowania krzywych i statystyk dla komputerów Macintosh (GraphPad Software Inc., San Diego, California, USA). Ponadto przetestowaliśmy dane dotyczące stężenia wapnia w surowicy, stosunku wapnia do moczu / kreatyniny w moczu i frakcjonowanego wydalania wapnia, aby zobaczyć, czy wariancja Pth. /. CaR. /. zwierzęta przekroczyły wariancję kontroli (definiując brak różnicy wariancji jako hipotezę zerową), stosując jedno-próbny test 2 (SAS / Analyst wersja 8, Cary, North Carolina, USA). Analizy statystyczne zostały częściowo wsparte przez Biostatistics Consulting Service w Centre for Clinical Investigation w Brigham and Women s Hospital. Figura 3Graph przedstawiająca zakres wartości dla (a) poziomów wapnia w surowicy, (b) stosunku wapnia do moczu do kreatyniny w moczu, oraz (c) frakcjonowanego wydalania wapnia dla myszy kontrolnych (wypełnione kwadraty) i Ptha / a CaR2 /. dobrane pod względem płci kocięta z miotu (wypełnione trójkąty). Figura 6 Odkrycia morfologiczne w kości kręgowej kontroli (a i c) i Ptha / p CaR2 /. (b i d) współmałżonkowie dobrani pod względem płci. Saggital (aib) i koronalne (cid) odcinki kręgosłupa u dorosłych myszy przygotowano do mikroskopii świetlnej i barwiono H & E. Tabela Profile krwi i moczu Pth. /. CaR. /. i kontrola myszy Wyniki Ratowanie letalnego fenotypu z niedoborem CaR przy braku PTH. Pth. /. CaR. /. myszy urodziły się w przewidywanych proporcjach Mendla. Śmiertelny fenotyp myszy z niedoborem CaR opisanym wcześniej przez Ho et al. (13) nie zaobserwowano u zwierząt z niedoborem PTH. Spośród ponad 40 wygenerowanych zwierząt, które były homozygotyczne pod względem zerowych alleli w loci PTH i CaR, wszystkie z wyjątkiem dwóch ciężarnych samic przeżyło dobrze w wieku dorosłym, wydawało się zdrowe i nie wykazywało żadnych widocznych nieprawidłowości. Zmniejszona płodność Pth. /. myszy. Podczas próby założenia kolonii hodowlanej zauważyliśmy bardzo zmniejszoną liczbę ciąż i potomstwa w klatkach Pth. /. myszy niezależnie od genotypu CaR. Pięć Pth. /. samice zmarły (w tym dwie Ptha / P CaRc / P) podczas ciąży lub podczas laktacji. Postawiliśmy hipotezę, że hipokalcemia podczas ciąży i laktacji była przyczyną śmierci i dlatego utrzymywała wszystkie Pth. /. myszy na diecie bogatej w wapń (2%), wysokiej. witaminy D. Aby zbadać wpływ diety wysokobiałkowej na poziomy wapnia w surowicy, dwie grupy zwierząt kontrolnych Ptha / aOr + / + utrzymywano na diecie regularnej lub wysokowapniowej przez 2 tygodnie, a następnie uśmiercano tak, aby można było uzyskać surowicę. uzyskane. Nie było różnicy w poziomach wapnia w surowicy myszy Ptha / aCaR + / + na dietach regularnych i wysokobiałkowych (dane nie pokazane). Wszystkie zwierzęta nadal miały obniżone wskaźniki rozmnażania, ale dieta bogata w wapń wydawała się zapobiegać śmierci matek podczas ciąży i karmienia piersią. Fenotypowe cechy Pth. /. CaR. /. w porównaniu do myszy kontrolnych. Dokonaliśmy porównań między Pth. /. CaR. /. myszy i osobniki z miotu z grupy kontrolnej, które miały Pth (3 (3R + / + lub Ptha / P CaR + / r. genotyp. Pth. /. CaR. /. myszy były nie do odróżnienia od swoich miotów z miotu pod względem wielkości, masy ciała i zachowania (ryc. i 2). Nie zaobserwowaliśmy różnic między myszami z niedoborem CaR a kontrolnymi miotami w badaniach mikroskopowych i histologicznych w tkankach z wielu narządów, w tym gonad, grasicy, mózgu, nerki, płuc i wątroby (dane nie przedstawione). Figura Wygląd zewnętrzny (a) 23-dniowego CaRa / a, CaR + / A i myszy CaR + / + i (b) 10-tygodniowych myszy Ptha / A CaRa / P, Ptha / AOr + /, i Ptha / P CaR + / +. Figura 2 Masa ciała Pth. /. CaR. /. i kontrolować myszy w zależności od wieku
[hasła pokrewne: wieniec zdrój sanatorium hutnik, finasteryd skutki uboczne, depilacja brazylijska poznań ]
[podobne: ostry dyzur okulistyczny, klinika stomatologiczna łódź, carcinoma adenoides cysticum ]