Rola mediatora wnikania wirusa opryszczki jako negatywnego regulatora odpowiedzi pośredniczonych przez limfocyty T cd

Co ciekawe, urządzenia APC firmy HVEM. /. myszy były bardziej aktywne w stymulowaniu komórek T niż myszy WT. Wyniki te potwierdzają, że HVEM może być ujemnym regulatorem aktywacji limfocytów T, co jest jaskrawym przeciwieństwem jego aktywności kostymulacji w aktywacji limfocytów T, przedstawionej w poprzednich badaniach. Następnie zbadaliśmy, czy LIGHT, dobrze zdefiniowany ligand HVEM, jest zaangażowany w negatywną regulację aktywacji komórek T za pośrednictwem HVEM. Równa liczba terminali WT, HVEM. /. I LIGHT. /. splenocyty hodowano w obecności ConA i mierzono proliferację limfocytów T i poziomy cytokin w tych supernatantach hodowli. Chociaż przybliżone liczby limfocytów T w śledzionach tych myszy były bardzo podobne, splenocyty z HVEM a /. myszy, ale nie od LIGHT. /. myszy wykazywały zwiększoną proliferację limfocytów T i zwiększone wytwarzanie cytokin w porównaniu do splenocytów WT w odpowiedzi na ConA (Figura 2E). Dane silnie sugerują, że LIGHT może nie być ligandem odpowiedzialnym za negatywną regulację aktywacji komórek T za pośrednictwem HVEM i że LIGHT może nie być jedyną cząsteczką oddziałującą z HVEM. Podawanie ConA myszom WT prowadzi do układowej aktywacji komórek T i zapalenia wątroby z udziałem komórek T. Aby ocenić rolę HVEM w aktywacji limfocytów T in vivo, WT i HVEM. /. myszom wstrzyknięto iv subletalną dawkę ConA (16 mg / kg). Zaskakująco, 6 z 7 HVEM. /. myszy padły w ciągu 8 godzin, podczas gdy wszystkie myszy WT (7 z 7) przeżyły przez co najmniej 24 godziny (Figura 3). W sumie w 6 niezależnych eksperymentach 15 z 28 HVEM. /. myszy zmarły w ciągu 8 godzin, podczas gdy 0 z 28 myszy WT zmarło. Aby porównać rolę LIGHT i HVEM in vivo, zakwestionowaliśmy WT, HVEM. /. I LIGHT. /. myszy z subletalnymi dawkami ConA (16 mg / kg). W tym eksperymencie, HVEM. /. myszy (5 z 5) były bardzo chore w ciągu 3 godzin po podaniu ConA i zaczęły umierać w ciągu 4 godzin, podczas gdy żadna z myszy WT (0 z 5) lub LIGHT. /. myszy (0 z 5) były chore (dane nie przedstawione). Aby zbadać, czy HVEM. /. u myszy rozwinęło się bardziej ciężkie zapalenie wątroby, surowice pobrane od tych traktowanych ConA WT i HVEM. /. myszy w różnych punktach czasowych mierzono dla poziomów aminotransferazy alaninowej (ALT). Nie wykryliśmy istotnych różnic w podwyższonych poziomach ALT w żadnej z grup myszy (ryc. 4A). Barwienie tkanek wątrobowych H & E i TUNEL obu grup myszy wykazało niski poziom naciekających leukocytów i równie małą liczbę komórek poddawanych apoptozie lub martwicy w wątrobach (danych nie pokazano). Te dane sugerują, że zwiększona zachorowalność i śmiertelność HVEM. /. myszy prawdopodobnie nie były spowodowane wyłącznie przez uszkodzenie wątroby. Rysunek 3HVEM. /. myszy są bardziej wrażliwe na prowokację ConA in vivo. Subletalny ConA (16 mg / ml) wstrzyknięto iv do porównywalnego względem wieku i płci WT i HVEMa / l. myszy (n = 7, 3. 5 miesięcy). Śmiertelność i zachorowalność 2 grup myszy rejestrowano co godzinę przez 24 godziny po wstrzyknięciu ConA. Pokazano jeden z czterech eksperymentów. Figura 4 Ograniczone uszkodzenie wątroby i poważne uszkodzenie śledziony występują po podaniu ConA. (A i B) Surowice z WT i HVEM. /. myszy zebrano po 2, 6 i 8 godzinach po wstrzyknięciu ConA. Określono poziomy ALT i AST w surowicy. HVEM. /. myszy wykazywały podobne poziomy ALT (A) i AST (B) do poziomów myszy WT. (C) Badanie histologiczne WT i HVEM. /. myszy po wstrzyknięciu ConA. Sekcje śledziony wybarwiono H & E i TUNEL. Sekcje śledziony HVEM. /. myszy wykazały ogromną utratę splenocytów i zwiększone skupienia apoptozy w strefie komórek T. W celu oceny całkowitego uszkodzenia tkanek, poziomy aminotransferazy asparaginianowej (AST) w WT i HVEMa. /. myszy po traktowaniu ConA zmierzono i wykazały równy wzrost o 6 godzin w obu grupach myszy (Figura 4B). W celu sprawdzenia, czy ConA spowodował nadreaktywność limfocytów T w nieobecności HVEM, sekcje śledziony z HVEMa traktowanego ConA A /. i myszy WT oceniano pod kątem potencjalnego uszkodzenia tkanki przez barwienie H & E. HVEM. /. myszy wykazywały bardziej poważną utratę komórek i zwiększoną apoptozę w obszarach miazgi białej, w szczególności w strefie limfocytów T, śledziony w 8 godzin po wstrzyknięciu ConA (Figura 4C). Te wyniki sugerują, że zwiększona zachorowalność w HVEM. /. myszy mogą nie być spowodowane głównie uszkodzeniem wątroby, ale raczej mogą być wynikiem nadmiernej aktywności splenocytów. Podwyższone stężenia cytokin w surowicy w HVEM. /. myszy po podaniu ConA. Aby sprawdzić, czy splenocyty z HVEM . /. myszy były hiperreaktywne po podaniu ConA, surowice z obu grup myszy zebrano w 2 i 6 godzin po podaniu ConA i zmierzono poziomy różnych cytokin, takich jak TNF-a, IFN-a, IL-2 i IL-2. 6, testem ELISA i / lub perełki cytokinowej
[przypisy: czym słodzić zamiast cukru, bartnik pl, gorvita zielony jęczmień opinie ]
[hasła pokrewne: łysoń sklep, sklep łysoń, bartnik pl ]