Rola mediatora wnikania wirusa opryszczki jako negatywnego regulatora odpowiedzi pośredniczonych przez limfocyty T

Mediator wnikania do wirusa opryszczki (HVEM), członek nadrodziny receptora TNF, został wcześniej opisany jako receptor kostymulacyjny komórek T. Co zaskakujące, HVEM. /. Komórki T wykazywały zwiększoną odpowiedź na stymulację in vitro konkanawaliną A (ConA) w porównaniu z komórkami T WT. Zgodnie z tymi ustaleniami, HVEM. /. myszy wykazywały zwiększoną zachorowalność i śmiertelność w porównaniu z myszami WT w modelu zależnego od ConA zależnego od komórek T autoimmunologicznego zapalenia wątroby. HVEM. /. myszy wytwarzały wyższe poziomy wielu cytokin, które były zależne od obecności limfocytów T CD4 +. Ponadto, HVEM. /. myszy były bardziej podatne na indukowaną peptydem MOG indukowaną autoimmunologiczną encefalopatię i wykazywały zwiększoną proliferację limfocytów T i produkcję cytokin w odpowiedzi na prowokację antygenową. Podsumowując, nasze dane ujawniły nieoczekiwaną regulacyjną rolę HVEM w odpowiedziach immunologicznych za pośrednictwem limfocytów T i chorobach autoimmunologicznych. Wprowadzenie Zaangażowanie specyficznego antygenu TCR w kompleks MHC / peptyd przedstawiony na APC stanowi pierwszy zasadniczy sygnał do aktywacji komórek T. Te sygnały, w których pośredniczy TCR modulowane przez cosygnalizowane cząsteczki eksprymowane na powierzchni komórki, skutkują zwiększeniem (kosztownością) odpowiedzi komórek T (1-3). Kilku członków rodziny B7 zidentyfikowano jako posiadających aktywność kostymulacyjną, która może odgrywać ważną rolę w różnych odpowiedziach z udziałem komórek T, takich jak autoimmunizacja i przeszczepianie narządów (4). Czasowe i przestrzenne wyrażenia cosignali regulują priming, wzrost, różnicowanie i funkcjonalne dojrzewanie odpowiedzi immunologicznych za pośrednictwem limfocytów T (1. 3). Oprócz rodziny B7, niektórzy członkowie nadrodziny TNF mogą również pełnić rolę kostymulującą w aktywacji limfocytów T (1, 2). LIGHT (TNFSF14), nowo zidentyfikowany, ko-stymulujący ligand, jest głównie eksprymowany na tkankach limfoidalnych, szczególnie na powierzchni aktywowanych DC i komórek T (5. 7). LIGHT jest silną cząsteczką kostymulacyjną komórek T, która wydaje się oddziaływać z mediatorem wejścia wirusa herpeswirusa (HVEM) wyrażanym na komórkach T (5, 6, 8). W odróżnieniu od większości innych cząsteczek kostymulujących dostarczających sygnały z APC, regulacja w górę LIGHT na komórkach T zwiększyła odporność zależną od limfocytów T i promowała choroby autoimmunologiczne i stany zapalne (9. 11). Miejscowa ekspresja LIGHT na tkankach guza indukowała silną ekspansję i aktywację komórek T, które doprowadziły do odrzucenia lokalnych i dystalnych guzów (12). I odwrotnie, LIGHT. /. myszy wykazywały zaburzenia odpowiedzi limfocytów T (13-15). Przejściowa transfekcja HVEM do ludzkich komórek 293 spowodowała znaczącą aktywację NF-kB, transkrypcyjnego regulatora wielu genów immunomodulacyjnych i zapalnych (16). Ostatnie badania zasugerowały, że sygnalizacja LIGHT-HVEM jest wymagana dla silniejszej odporności za pośrednictwem komórek T (9. 11, 17). Aby bezpośrednio zbadać istotną rolę HVEM w aktywacji limfocytów T, wygenerowaliśmy HVEM. /. myszy. Nieoczekiwanie, HVEM. /. myszy wykazywały zwiększoną odpowiedź na różne bodźce komórek T, zarówno in vivo, jak i in vitro, i były bardziej podatne na rozwój chorób autoimmunologicznych, ujawniając w ten sposób inną potencjalną funkcję HVEM jako możliwego inhibitora odpowiedzi komórek T. Wyniki Generowanie i analiza myszy HVEM KO. Aby bezpośrednio określić istotną funkcję HVEM in vivo, wygenerowaliśmy HVEM. /. myszy przez celowanie genetyczne, jak pokazano na Figurze 1A. Analiza Southern blot wykazała rozbicie genu kodującego HVEM w obu komórkach ES i myszach po przeniesieniu mutacji HVEM linii zarodkowej (Figura 1B). Analiza Northern blot RNA z WT i HVEM a /. tkanki śledziony (Figura 1C) i analiza cytometrii przepływowej (Figura 1D) limfocytów krwi obwodowej z WT i HVEMa /. myszy potwierdziły, że docelowy allel kodujący HVEM miał mutację zerową. Prawie wszystkie limfocyty krwi obwodowej WT zabarwiły się pozytywnie na HVEM. Podwójne barwienie komórek węzłów chłonnych myszy WT z mAb anty-CD3 i anty-HVEM ujawniło, że komórki CD3 + wyrażały wyższe poziomy HVEM niż populacje komórek nie-T. Ekspresja HVEM była całkowicie nieobecna w HVEM. /. myszy w obu typach komórek (Figura 1D). Mioty z HVEM. /. myszy urodziły się z oczekiwaną częstotliwością i rozmiarem z normalnym dojrzewaniem i płodnością. Populacje T, B, NK i DC w grasicy, węzłach chłonnych i śledzionie były prawidłowe (Figura 1E i dane nie pokazane). Ponadto wytwarzanie przeciwciał IgM i IgG w odpowiedzi na hemocyjaninę skałoczepa i owczą rbc wydawało się normalne w HVEMa / l. myszy (dane nie pokazane). Podobny do LIGHT. /. myszy, HVEM. /. myszy nie wykazywały żadnych defektów w organogenezie tkanek limfatycznych i rozwoju limfocytów. Ryc. 1. Rzadkie zakłócenie locus HVEM
[patrz też: bartnik pl, gorvita zielony jęczmień opinie, sprzęt pszczelarski łysoń ]
[przypisy: jak zakończyć karmienie piersią, płatki owsiane na wodzie, podchloryn sodu dawkowanie ]