Sumoilated HSP90 jest dominującym czynnikiem dziedziczącym ryzyko dyssypcji komórek plazmatycznych

Posttranslacyjnie zmodyfikowane białka służą jako cele autoimmunogenne w szerokim spektrum chorób autoimmunologicznych. W tym miejscu zidentyfikowaliśmy potranslacyjnie zmodyfikowany cel paraproteinowy (paratargs) w monoklonalnych gammopatiach o nieokreślonym znaczeniu (MGUS), szpiczakach mnogich (MM) i makroglobulinemiach Waldenstroma (WM) przy użyciu makromacierzy białkowych, które zostały podsumowane i przebadane pod kątem reaktywności z paraproteinami z MGUS , MM i WM. Stwierdziliśmy, że paraproteiny z części europejskich, afroamerykańskich i japońskich pacjentów reagowały specyficznie z sumoilowanym białkiem szoku cieplnego 90. izoform-. (HSP90-SUMO1, gdzie SUMO wskazuje na mały modyfikator podobny do ubikwityny), podczas gdy nie wykryto reaktywności z HSP90-SUMO1 w ponad 800 kontrolach. HSP90-SUMO1 był obecny w krwinkach od wszystkich pacjentów z paraproteinami wiążącymi HSP90-SUMO1 .. Stwierdziliśmy, że stan nośnika HSP90-SUMO1 jest dziedziczony autosomalnie dominująco i spowodowany niezdolnością peptyfazy SUMO-sentrydyny / proteazy SUMO specyficznej względem SUMO 2 (SENP2) do desumoilacji HSP90-SUMO1. HSP90-SUMO1 wykryto u niewielkiego odsetka zdrowych osób ze wszystkich środowisk; jednakże tylko pacjenci MGUS, MM i WM, którzy byli nosicielami HSP90-SUMO1 wytwarzali specyficzne paraproteiny HSP90-SUMO1 ., co sugeruje, że sumoilowany HSP90 promuje patogenezę tych chorób poprzez przewlekłą stymulację antygenową. Badanie to wykazuje, że posiadanie HSP90-SUMO1 identyfikuje zdrowe osoby zagrożone dysracją komórek plazmatycznych i że dominujące dziedziczenie posttranslacyjnie zmodyfikowanych paratagów autoantygenowych jest jednym z najsilniejszych zdefiniowanych molekularnie czynników ryzyka dla MGUS, MM i WM. Wprowadzenie Ostatnio zidentyfikowaliśmy cel 7 paraproteiny (paratarg-7) jako cel do 37% paraprotein z gammopatii monoklonalnych o nieokreślonym znaczeniu (MGUS) / pacjentów ze szpiczakiem mnogim (MM3). Wszyscy pacjenci z paraproteinami swoistymi dla paratarg-7a byli nosicielami hiperfosforylowanej modyfikacji paratarg-7 (pP-7) (4), a stan nośnika pP-7 jest dziedziczony w sposób autosomalny dominujący (4). Poza paratarg-7 zidentyfikowano 10 dodatkowych paratargów (5), z których większość wykazała, że hiperfosforylacja jest stałym wynikiem i najbardziej prawdopodobną przyczyną przewlekłej stymulacji autoantygenicznej (6). Aby nie pominąć posttranslacyjnie zmodyfikowanych autoantygenowych celów paraprotein, które nie reagują krzyżowo z wersją niemodyfikowaną, zmodyfikowaliśmy posttranslacyjnie białka macierzy związane z błoną in vitro. Tutaj pokazujemy, że sumoilacja in vitro makrofagów białek ludzkich związanych z błoną umożliwiła identyfikację nieprawidłowo sumoilowanego białka jako częstego i autosomalnie dominującego dziedzicznego autopatogennego celu paraprotein. Wyniki Identyfikacja sumoilated paratargs. Surowice zawierające paraproteiny (6 IgA, 31 IgG, 3 IgM) rozcieńczone 1: 107 przeszukiwano pod względem reaktywności z sumatylowanymi białkami in vitro reprezentowanymi na makromacierzy pochodzącej z mózgu płodu. Otrzymano dwa sygnały. Te 2 immunoreaktywne klony ulegały ekspresji w E. coli, a odpowiednie białka znakowane His6 sumoilowano albo w roztworze, albo po nakropieniu na membrany z difluorku poliwinylidenu (PVDF). Badanie przesiewowe tych 2 klonów za pomocą 40 paraprotein od pacjentów europejskich spowodowało identyfikację surowic zawierających parokroteinę 6/40 reagujących z sumoilowanym białkiem szoku cieplnego 90. izoform-. (HSP90-SUMO1, gdzie SUMO wskazuje na mały modyfikator podobny do ubikwityny) (WT NP_031381), podczas gdy immunoreaktywność drugiego klonu nie może być potwierdzona. Pacjenci. sera nie wykazywały immunoreaktywności względem samego białka WT HSP90 lub WT SUMO1 (reprezentowanego przez VCP-SUMO1), co wskazuje na reakcję immunologiczną swoistą dla sumoilowanego HSP90 (Suplementowa Figura 1, materiał uzupełniający dostępny online z tym artykułem; doi: 10,1172 / JCI76802DS1). Nie zaobserwowano reakcji na HSP90-SUMO2 lub HSP90-SUMO3, co wskazuje, że sygnały były specyficzne dla izoformy HSP90-SUMO1. Ponadto badania absorpcji z użyciem kolumn powinowactwa HSP90-SUMO1 wykazały, że cały monoklonalny składnik był ukierunkowany na HSP90-SUMO1 (dodatkowa postać 2). Częstotliwość występowania specyficznych paraprotein HSP90-SUMO1 . i rozpowszechnienie nosicielstwa HSP90-SUMO1 w różnych grupach etnicznych. Surowice pochodzące od europejskich, japońskich i afroamerykańskich pacjentów z MM / MGUS analizowano pod względem immunoreaktywności wobec HSP90-SUMO1 (Tabela i Tabela uzupełniająca 1). W rozcieńczeniu 1: 107, 27/226 (11,9%) surowic od europejskich, 9/80 (11,2%) od Afroamerykanów i 9/176 (5,1%) od pacjentów z Japonii zareagowało. Nie wykryto reaktywności w surowicach rozcieńczonych 1: 102 z 550 europejskich, 100 afrykańsko-amerykańskich i 278 japońskich zdrowych kontrolnych (mniej rozcieńczonych surowic nie można było testować z powodu reaktywności w tle)
[patrz też: bartnik pl, podchloryn sodu dawkowanie, carcinoma adenoides cysticum ]
[podobne: bartnik pl, sprzęt pszczelarski łysoń, centrum pszczelarskie łysoń ]