Trostostymina, heterodimer dwóch nowych ludzkich podjednostek hormonu glikoproteinowego, aktywuje receptor hormonu tarczycy ad 7

Uważa się, że znane heterodimery hormonów glikoproteinowych są stabilizowane przez segment. podjednostka, która owija się wokół. podjednostka jak pas bezpieczeństwa (8). Jednak podjednostka B5 jest wyjątkowa, ponieważ nie zawiera wiązania dwusiarczkowego ważnego dla tworzenia pasów bezpieczeństwa. Rzeczywiście, niniejsza analiza wskazała, że heterodimer A2 / B5 jest mniej stabilny niż znane hormony glikoproteinowe podczas analizy SDS-PAGE. Chociaż niższe powinowactwo między podjednostkami A2 i B5 wyklucza jego oczyszczanie z zastosowaniem procedur podobnych do tych dla klasycznych hormonów glikoproteinowych, rekombinowany heterodimer można wykryć stosując obecne podejścia oparte na analizie dimerycznego oczyszczania i sieciowania, podkreślając wartość tego paradygmatu w identyfikacji. pozostali członkowie rodziny hormonów glikoproteinowych. Zastąpienie obszaru pasa bezpieczeństwa TSH-. z odpowiednimi regionami CG-y lub FSH-. nadaje aktywność LH, ale nie aktywność FSH chimerycznemu TSH (34), podczas gdy mutacja punktowa kluczowej cysteiny 105 w TSH-a w pobliżu obszaru pasa bezpieczeństwa doprowadziło do powstania nieaktywnego krążącego TSH (22). Ponieważ konformacja pasma nie wydaje się odgrywać istotnej roli w bioaktywności FSH (35), badania strukturalno-funkcjonalne wykorzystujące B5 są interesujące i mogą ujawnić dokładne domeny zaangażowane w specyficzność oddziaływań receptorowych dla ligandów z tej rodziny. Spośród różnych hormonów glikoproteinowych wyjaśniono strukturę krystaliczną hCG i FSH (8,36). Heterodimer tyreostymuliny dostarcza unikalnego modelu do dalszego wyjaśnienia strukturalno-funkcjonalnej zależności tej rodziny ligandów glikoproteinowych zawierających węzły cystynowe. Zaproponowano, że. podjednostki gonadotropin i TSH zapewniają specyficzność interakcji receptorowych, podczas gdy wspólne. podjednostka oddziałuje z transbłonowym regionem receptora, aby aktywować białka G (37). Obecne odkrycie aktywacji receptora TSH przez A2 / B5 sugeruje, że B5 może być odpowiedzialny za interakcję z ektodomeną receptora TSH, podczas gdy A2 aktywuje region transbłonowy zajętego receptora. Jednak nasze wstępne testy wykazały, że heterodimer składa się ze znanego. a nowe podjednostki B5 nie aktywowały receptora TSH, a A2 / CG-p. heterodimer nie aktywował receptora LH. Tak więc różne heterodimery, w tym A2 / B5, prawdopodobnie przyjmują odmienną konformację w stanie heterodimerycznym, która jest optymalna dla oddziaływania z określonymi receptorami. Fuzję genów i zamianę domen pomiędzy różne geny podjednostek hormonu glikoproteinowego zastosowano do wytworzenia różnych rekombinowanych analogów gonadotropiny i tyreotropiny (9, 38, 39). Podobne podejścia z wykorzystaniem podjednostek A2 i B5 mogą ułatwić zrozumienie mechanizmów sygnalizacyjnych ligandów dla hormonów w tej rodzinie. Podsumowując, niniejsze badanie dostarcza nowego podejścia do odkrywania heterodimerycznych hormonów białkowych w oparciu o zależności filogenetyczne między genami paralogicznymi i zastosowanie dwuhybrydowej analizy drożdży do identyfikacji heterodimerycznych kandydatów na ligand. Chociaż test drożdżowy był szeroko stosowany do testowania potencjalnych oddziaływań między parami wewnątrzkomórkowych białek (12), jego przydatność do białek pozakomórkowych była ograniczona (40). Odkrycie nowego funkcjonalnego heterodimerycznego hormonu w rodzinie hormonów glikoproteinowych otwiera drogę do identyfikacji pozostałych członków tej rodziny ligandów i przyszłego wyjaśnienia ewolucyjnego związku między rodziną heterodimerycznych ligandów, znanych receptorów hormonów glikoproteinowych i pokrewnymi. bogate w leucynę, zawierające powtórzone receptory sprzężone z białkiem G (41, 42). PodziękowaniaTo dzieło zostało wsparte grantem NIH HD-23273. Dziękujemy Danette Daniels i T. Sugawara z Uniwersytetu Stanforda za pomoc w oczyszczeniu tyreostatimuliny i immunobarwieniu, C. Spencer za pomoc redakcyjną, G. Vassart (Free University, Belgia) za cDNA receptora TSH, oraz Narodowy Program Hormon i Peptyd dla różne hormony przysadki. Przypisy Zobacz odnośny komentarz od strony 1401.
[hasła pokrewne: bartnik bielsko, podchloryn sodu dawkowanie, płatki owsiane na wodzie ]
[więcej w: sklep łysoń, bartnik pl, sprzęt pszczelarski łysoń ]