Zachowanie wysokoenergetycznych fosforanów mięśnia sercowego podczas niedokrwienia o małym natężeniu przepływu z modyfikacją powinowactwa hemoglobiny do tlenu ad

Dlatego zastosowaliśmy spektroskopię 31P jądrowego rezonansu magnetycznego (NMR), jedyną metodę, która może nieniszcząco określić ilościowo i zindeksować seryjne zmiany w wysokoenergetycznych fosforanach podczas niedokrwienia, w celu przetestowania hipotezy, że przesunięcie w prawo krzywej dysocjacji Hb O22 indukowanej przez RSR13, silny syntetyczny allosteryczny modyfikator powinowactwa hemoglobiny, zmniejsza spadek wysokoenergetycznych fosforanów w mięśniu sercowym i wewnątrzkomórkowe pH podczas niedokrwienia o niskim przepływie w sercu psa in vivo. Metody Chirurgia zwierzęca. Dochodzenie było zgodne z Przewodnikiem na temat opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych, opublikowanym przez US National Institutes of Health (NIH, publikacja nr 85-23, zrewidowany w 1985 r.). Kundlowate ważące 15-22 kg badano pod znieczuleniem pentobarbitalem sodu dozowanym początkowo w dawce 25-30 mg / kg i powtarzano w razie potrzeby. Psy zaintubowano doustnie za pomocą zakręconej rurki intubacyjnej i oddychanie utrzymywano za pomocą respiratora. Uzupełniające podawanie tlenu krwi tętniczej pO2 150 mmHg. Do lewej żyły udowej i tętnicy wprowadzono kaniulę do podawania płynów dożylnych, a także do pobierania krwi tętniczej podczas zastrzyków mikrokulek. Lewa boczna torakotomia została wykonana w piątej przestrzeni międzyżebrowej, osierdzie było otwarte do przodu i powstała kołyska. Cewnik umieszczono w lewym przedsionku w celu wstrzyknięcia mikrokulek w celu zmierzenia przepływu krwi w mięśniu sercowym. Bliższa część tętnicy wieńcowej z lewej (LAD) została rozcięta. Lewą wspólną tętnicę szyjną oddzielono wolną i najbardziej dystalną część podwiązano. Rurkę z tworzywa sztucznego ze zmiennym rezystorem przepływu wprowadzono pomiędzy proksymalną tętnicę szyjną i tętnicę LAD, która została zligowana proksymalnie. Stworzyło to przeciekanie naczyniowe, które pozwoliło na stopniową kontrolę przepływu krwi w tętnicy wieńcowej LAD. Rurkę wypełnioną płynem wprowadzono przez boczne gniazdo w obrębie zastawki naczyniowej tuż nad wkładką LAD; jego dystalne połączenie z przetwornikiem ciśnienia Gould umożliwiło ciągły pomiar ciśnienia perfuzji tętnicy wieńcowej na rejestratorze Gould a. Przed umieszczeniem zastawki naczyniowej podawano dożylnie dawkę bolusa 9000 U heparyny, a co godzinę podawano powtarzane dawki 2000 U. Cewkę powierzchniową NMR umieszczono na terytorium LAD, a cewkę i otaczające ją struktury przykryto folią w celu zmniejszenia utraty płynu. Następnie psa umieszczono w magnesie / spektrometrze 4,7 T NMR. Eksperymentalny protokół. Pierwszy protokół eksperymentalny miał na celu ustalenie, czy RSR13 podawany przed niedokrwieniem zmniejsza osłabienie wysokoenergetycznych fosforanów podczas niedokrwienia o niskim przepływie. Podsumowano to na ryc. 1. Początkowo badano czternaście psów, z których 12 psów spotkało się i ukończyło protokół z jednym wykluczeniem z każdej grupy. W warunkach wyjściowych RSR13 (100 mg / kg, 20% objętości w zakresie 88. 103 ml) podawano dożylnie za pomocą pompy przez 15 minut u sześciu zwierząt, podczas gdy sześć innych, które otrzymywały 0,9% roztwór NaCl służyło jako kontrole. Niedokrwienie mięśnia sercowego wytworzono 10 minut później, obniżając ciśnienie perfuzji wieńcowej do i utrzymując je przy 35 mm Hg przez 20 minut, co we wstępnych doświadczeniach zmniejszyło zawartość PCr do ustalonego poziomu. Widma 31P NMR zebrano przed, podczas i po niedokrwieniu w celu oznaczenia względnej zawartości wysokoenergetycznej fosforanu serca i pH wewnątrzkomórkowego. Dane hemodynamiczne, w tym ciśnienie krwi, ciśnienie perfuzji wieńcowej i częstość akcji serca, zbierano w odstępach 5-minutowych przez cały eksperyment. Radioaktywne mikrosfery wstrzykiwano po podaniu RSR13 lub nośnika, ale przed niedokrwieniem i ponownie 5 minut przed końcem okresu niedokrwienia w celu określenia przepływu krwi przez mięśnie sercowe (technika opisana poniżej). Perfuzję przywrócono po 20 minutach niedokrwienia przez usunięcie częściowego okluzji na przecieku naczyniowym. Na zakończenie badania błękit klasztorny wstrzyknięto do zastawki naczyniowej w celu rozgraniczenia złoża LAD dostarczonego przez przepływ zastawki i w celu potwierdzenia położenia cewki NMR nad tym złożem. Zwierzęta następnie uśmiercono przedawkowaniem chlorku potasu. Serca zostały natychmiast usunięte w celu określenia przepływu krwi mikrosfer. Rysunek Pierwszy protokół eksperymentalny: podawanie RSR13 przed niedokrwieniem. NMR, magnetyczny rezonans jądrowy. Celem drugiego protokołu eksperymentalnego było ustalenie, czy RSR13 podawany podczas niedokrwienia poprawiłoby metaboliczne i skurczowe konsekwencje niedokrwienia o niskim przepływie. Podsumowanie przedstawiono na rycinie 2. Parametry metaboliczne badano za pomocą 31P NMR w jednej serii psów, a parametry kurczliwości badano parami regionalnych kryształów somatomerów i cewnikiem ciśnienia lewej komory (Millar) przed i podczas gorączki dolnej żyły dolnej (IVC) u innych zwierząt w podobnych warunkach
[przypisy: jak zakończyć karmienie piersią, finasteryd skutki uboczne, operacje plastyczne dr szczyt ]
[przypisy: łysoń sklep, sklep łysoń, bartnik pl ]