Zachowanie wysokoenergetycznych fosforanów mięśnia sercowego podczas niedokrwienia o małym natężeniu przepływu z modyfikacją powinowactwa hemoglobiny do tlenu cd

Po okresie stabilizacji uzyskano podstawowe miary. Niedokrwienie mięśnia sercowego wytworzono przez obniżenie ciśnienia perfuzji wieńcowej do 35. 45 mmHg i utrzymywanie go na tym poziomie w każdym sercu przez 30. 40 min. Parametry skurczowe i metaboliczne mierzono od 5 do 10 minut niedokrwienia o niskim przepływie. RSR13 (100 mg / kg) podawano dożylnie przez pompę w ciągu 10 minut wszystkim zwierzętom. Zmierzono parametry kurczliwości i metaboliczne. 7. 12 min po zakończeniu infuzji RSR13 lub. 30 min po wystąpieniu niedokrwienia o niskim przepływie. Dane hemodynamiczne, w tym ciśnienie krwi, ciśnienie perfuzji wieńcowej i częstość akcji serca były również rejestrowane u wszystkich zwierząt. Zwierzęta uśmiercono przedawkowaniem chlorku potasu. Ryc. 2 Drugi protokół eksperymentalny: podawanie RSR13 podczas niedokrwienia. Metody 31P NMR. Zwyczajnie zbudowana, podwójnie dostrojona cewka powierzchniowa wodoru-1 i 31P (o średnicy 4 cm) została starannie ustawiona na terytorium LAD przed umieszczeniem każdego zwierzęcia w magnesie 4,7 T NMR połączonym z GE Omega. obrazowanie / spektroskopia (General Electric, Milwaukee, Wisconsin, USA). Jednorodność pola magnetycznego została zoptymalizowana poprzez przesunięcie na sygnał protonu wodnego. Nunowane pozyskiwanie 31P NMR zbierano w ciągu 2 minut (opóźnienie 2-sekundowe, 60 impulsów, kąt przesunięcia. 30 °) w serii przed, podczas i po niedokrwieniu. Szczytowe obszary zostały określone przez półautomatyczny program dopasowania w dziedzinie czasu (21). Wyniki metabolitu wyrażono jako procent wartości niedokrwiennych. Stosunki PCr / ATP nie zostały skorygowane o częściowe efekty nasycenia uważane za minimalne w tych warunkach eksperymentalnych. Wewnątrzkomórkowe pH określano na podstawie względnego przesunięcia chemicznego nieorganicznego piku fosforanowego (22). Przepływ krwi w mięśniu sercowym przez radioaktywne mikrosfery. Przepływ krwi w mięśniu sercowym określano przy użyciu ustalonej techniki mikrosfer radioaktywnych (23). Pokrótce, znaną ilość zawieszonych cząstek mikrosfery znakowanych radionuklidami 153Gd lub 113Sn wstrzykuje się do lewego przedsionka, podczas gdy krew jest pobierana w sposób ciągły z cewnika tętnicy udowej za pomocą pompy Harvard. Gadolin-153 służy do oznaczania przepływu krwi przed niedokrwieniem, a cyna-113 służy do obliczenia przepływu krwi podczas niedokrwienia. Pod koniec eksperymentu tkanka mięśnia sercowego jest dzielona na fragmenty i oznaczana jako niedokrwiona (barwiona błękitem monastalnym) lub bez niedokrwienia. Każda z próbek jest dalej dzielona na warstwy nasierdziowe, środkowe i wsierdziowe. Zebrane próbki tkanek krwi i mięśnia sercowego umieszcza się następnie w układzie zliczającym auto-gamma Cobra (Packard Instrument Co., Meriden, Connecticut, USA) i uzyskuje się ilościowy pomiar promieniowania gamma. Ponieważ liczba mikrosfer uwięzionych w danym obszarze tkanki jest wprost proporcjonalna do przepływu krwi do tego regionu, a ponieważ można je oszacować poprzez pomiar aktywności gamma próbki tkanki pośmiertnej, pomiar ten w połączeniu z wykalibrowanym pobraniem próbki zawierających mikrokulki krwi tętniczej, pozwala na obliczenie regionalnego przepływu krwi. Matematyczna zależność dla określenia przepływu krwi za pomocą tej techniki to Qref / Qtis = Cref / Ctis, gdzie Qref i Qtis przedstawiają odpowiednio szybkość wycofania referencyjnych próbek krwi i regionalnego przepływu krwi w tkance, a Cref i Ctis reprezentują liczbę zliczeń w referencyjnych próbkach krwi oraz w próbce tkanki, odpowiednio. Hemoglobinę p50 oznaczono na próbkach tętniczych uzyskanych przed i 5 min po zakończeniu infuzji RSR13 w pierwszym protokole doświadczalnym za pomocą trzy-punktowej tonometrii przy użyciu przyrządu Hemoscan. Miary regionalnej funkcji skurczowej. Pary kryształów sonomrometrów zapewniły długość odcinka przedniej i bocznej ściany odpowiednio z obszarów LAD i okolic obwodowych. Skrócenie frakcyjne było równe (długość końcowo-rozkurczowa – długość końcowa skurczowa) / długość końcowo-rozkurczowa x 100. Wykreślano również długość segmentu w porównaniu z równoczesnym ciśnieniem w lewej komorze w celu uzyskania pętli o długości ciśnienia. Prace regionalne pochodziły z obszaru opisanego w każdej pętli, obliczonego na podstawie integracji cyfrowej. Ciśnienie końcowe diastoliczne przyjęto jako ciśnienie, gdy dP / dt przekroczyło 10% jego maksymalnej wartości po rozpoczęciu aktywacji elektrycznej. Relacje między ciśnieniem a wymiarem były również mierzone przez przejściowe zmniejszanie objętości obciążenia wstępnego przez niedrożność dopływu żyły głównej dolnej. Końcowa zależność długości odcinka od ciśnienia skurczowego zapewnia użyteczną ocenę regionalnej funkcji kurczliwości (24). Analiza statystyczna. Wyniki zmiennych ciągłych są podawane jako średnie. SEM
[patrz też: jak zakończyć karmienie piersią, bartnik pl, wrzodziejące zapalenie jelita grubego dieta ]
[przypisy: sprzęt pszczelarski łysoń, centrum pszczelarskie łysoń, sklep pszczelarski łysoń ]